蓖麻毒素使用能在5天内导致人死亡相比较而言，儿童比***更容易中毒如果是通过呼吸道吸入的，蓖麻毒素使用可能会导致呼吸衰竭在36到48小时内导致死亡。如果是通过注射进入体内那么蓖麻毒素使用将会立即导致注射部位的肌肉和淋巴节坏死，接着人体的其它一些主要***也跟着无法正常工作從而导致死亡

 蓖麻毒素使用能在5天内导致人死亡。相比较而言儿童比***更容易中毒。如果是通过呼吸道吸入的蓖麻毒素使用可能会導致呼吸衰竭，在36到48小时内导致死亡如果是通过注射进入体内，那么蓖麻毒素使用将会立即导致注射部位的肌肉和淋巴节坏死接着人體的其它一些主要***也跟着无法正常工作，从而导致死亡如果蓖麻毒素使用通过服用进入人体，通常会导致呕吐和内出血从而导致肝脏、胰、肾等衰竭死亡，整个人体内循环系统也就瘫痪了
我想知道如何把蓖麻毒素使用提纯??????

【摘要】目的应用酶联免疫吸附汾析方法(ELISA)检测待测样品中的蓖麻毒素使用方法用蛋白G亲和层析柱纯化蓖麻毒素使用单克隆抗体(4C13,3D74,5E4和5H6),以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗體夹心ELISA对含有蓖麻毒素使用的多种样品进行检测。结果抗蓖麻毒素使用的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素使用标准品的检测灵敏度可达2.5μg·L-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁中的蓖麻毒素使用样品检测的灵敏度为2.5～5.0μg·L-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素使用的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明顯减弱结论双抗体夹心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素使用样品的检测分析。

蓖麻毒素使用(ricin)是一种型核糖体失活蛋白,相对分子质量为66ku,由2个多肽链组成,A链、B链以二硫键相连,理化性质稳定[1,2]作为蛋白合成抑制剂,蓖麻毒素使用具有毒性极强、中毒途径多、潜伏期长、性质穩定、制备容易、无特效解毒药[3,4]等特点,其吸入或注射的***致死量为5~10gkg-1,进入体内后,蓖麻毒素使用B链上的半乳糖结合位点与细胞表面含末端半乳糖残基的受体结合,毒素分子内陷进入细胞,链间二硫键被还原,游离出A链。A链是一种蛋白酶,作用于核糖体60S亚单位的28SrRNA,使其脱腺嘌呤,丧失对RNA酶的忼性而被降解导致蛋白质合成的抑制,最终细胞死亡[4,5]蓖麻毒素使用在蓖麻籽中含量高,可达重量的1%~5%[6],制备工艺简单,易被恐怖分子用于恐怖袭击。因此,建立蓖麻毒素使用的检测方法,对染毒样品进行有效、准确的检测,对于蓖麻毒素使用污染样品的检测及中毒人员的临床诊断等具有重偠的意义根据蓖麻毒素使用的理化性质和免疫原性已建立了多种检测方法。仪器分析方法多根据毒素的理化性质,如毛细管电泳结合基质輔助激光解吸附电离质谱法等,具有灵敏度高,样品用量少等特点,但仪器昂贵,普及困难,难以进行现场快速分析[7]根据毒素的抗原特性建立的免疫分析方法包括放射免疫分析、免疫PCR、酶联免疫吸附分析(ELISA),免疫层析法和电化学生物传感器等[8],放免分析和免疫PCR具有较高的检测灵敏度,但是要求在专业实验室进行,而且检测需要专业技术人员操作。生物传感器操作快速,然而检测灵敏度差异较大,干扰因素多蓖麻毒素使用快速检测試纸是根据胶体金免疫层析原理,其检测灵敏度高,操作简便快速[9],适用于污染水源、部分食品中毒素的检测分析,然而多种样品本身对此方法存茬严重的干扰,易形成假阳性结果,因此需要一种操作快速、在普通实验室即可进行的检测分析方法对这些样品进行分析,以补充检测试纸的不足。本实验通过蓖麻毒素使用单克隆抗体(mAb)作用的表位分析,参照郭建巍等[10]的蓖麻毒素使用分析方法,选择作用于毒素连续性抗原表位的mAb4C13作为辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体,以作用于毒素构象表位的mAb3D74为包被抗体,通过优化检测条件,建立ELISA方法检测了对于毒素检测试纸存在干扰的多种样品1材料与方法11主要试剂与仪器蓖麻毒素使用由军事医学科学院毒物药物研究所毒物分析实验室提供;抗蓖麻毒素使用mAb4C13,3D74,5E4和5H6腹水由军事医学科学院基礎医学研究所制备;蛋白G-Sepharose4FastFlow柱(瑞典Am-ersham公司);HRP(北京欣经科生物技术公司);牛血清白蛋白(BSA,北京元亨圣马生物技术研究所);N-四甲基联苯胺(TMB,北京中杉金桥生物技術公司)。小鼠血清取自昆明种雌性小鼠(体重26~28g,摘除眼球取血,血液4凝固后500g离心5min,取血清备用);人血清为中国人民解放军307医院提供的健康***血清LabsystemMultiskanMCC/340酶标仪(芬兰),UV-250型分光光度计(日本岛津公司),TG16W高速离心机(长沙平凡仪器厂)。12蛋白G亲和层析纯化蓖麻毒素使用单克隆抗体参照林清华等[11]方法,以蛋白G-Sepharose4B純化蓖麻毒素使用mAb将腹水10000g离心5min。取上清过滤后同等体积结合缓冲液(pH74)混合,于4,蛋白G-Sepharose4B层析柱反复上样5次,以结合缓冲液洗脱杂蛋白至基线后继续沖洗约10个床体积,以洗脱液(01molL-1glycine-HCl,pH27)洗脱抗体,收集抗体迅速以中和液(10mol

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