| ? 苹果轮纹病概述 |
| ? 苹果轮纹病的发生及危害 |
| ? 苹果轮纹病的防治 |
| ? 芽胞杆菌生防功能与作用机制 |
| ? 抗生作用 |
| ? 空间和营养竞争 |
| ? 溶菌作用 |
| ? 诱导抗病性 |
| ? 芽胞杆菌脂肽类抗生素的研究进展 |
| ? 脂肽类抗生素的分类及结构 |
| ? 脂肽类抗生素生物合成机制和调控途径 |
| ? 脂肽类抗生素生物学功能 |
| ? 芽胞杆菌实现遗传操作的方法 |
| ? 研究目的与研究意义 |
| ? 研究内容与技术路线 |
| ? 培养基和溶液配制 |
| ? 主要實验仪器 |
| ? 苹果轮纹病菌孢子悬液的制备及接种 |
| ? 平板对峙培养 |
| ? 扫描电镜样品制备程序 |
| ? 菌株和质粒 |
| ? 培养基的配制 |
| ? 主要实验仪器 |
| ? 苹果轮纹病菌培养及孢子悬液的制备 |
| ? 细菌无菌上清液的制备及抑菌活性检测 |
| ? 脂肽类抗生素粗提物的制备 |
| ? 基因组DNA的提取 |
| ? PCR扩增的体系与条件 |
| ? SOE-PCR扩增的体系与条件 |
| ? PCR产物纯化与连接 |
| ? 大肠杆菌感受态细胞的制备及热击转化 |
| ? 质粒的体内甲基化修饰 |
| ? 解淀粉芽胞杆菌感受态细胞的制备及电击转化 |
| ? 重组质粒热击转化大肠杆菌 |
| ? 质粒DNA的提取 |
| ? 利用木糖诱导的ComK表达载体进行基洇敲除 |
| ? 脂肽类抗生素毒力测定 |
| ? 脂肽类抗生素分离纯化及HPLC分析 |
| ? 生长曲线的测定 |
| ? 抑菌活性测定 |
| ? 紫外线照射、蛋白酶K、热处理和酸碱处理对B.amyloliquefaciens PG12无菌上清液抑菌活性的影响 |
| ? B.amyloliquefaciens PG12无菌上清液及脂肽类抗生素粗提物对轮纹病菌菌丝生长的抑制作用 |
| ? 脂肽类抗生素粗提物对轮纹病菌的抑制作用 |
| ? 主要脂肽类抗生素家族合成基因 |
| ? 脂肽类忼生素对苹果轮纹病菌的毒力测定 |
| ? 将改进的方法应用于其他解淀粉芽胞杆菌 |
| ? 脂肽类抗生素合成基因突变体的构建 |
| ? 菌株和质粒 |
| ? 培养基和溶液的配制 |
| ? 主要实验仪器 |
| ? 苹果轮纹病菌孢子悬液的制备 |
| ? 脂肽类忼生素粗提物的制备 |
| ? 生物膜测定 |
| ? 运动性测定 |
| ? 苹果果实生物测定 |
| ? 本研究的创新性 |
梨轮纹病又名粗皮病是梨树的偅要病害之一。为害和防治要点与苹果轮纹病相似。日本梨系统受害最重枝干受害后，使树势早衰果实受害后，造成生长期及贮存期的烂果
一、发病症状：梨轮纹病主要为害枝干及果实。在枝干上以皮孔为中心形成褐色突起的小病斑，直径5-15毫米次年病斑内产生許多黑点状的分生孢子器。以后病斑边缘发生裂缝许多病斑密集后成粗皮状。多数病斑限于树皮表层少数可烂到形成层或木质部。果實多在近成熟期或贮存期发病以皮孔为中心发生近圆形有轮纹的褐斑，通常一个果上产生2-3个病斑后期斑内产生小黑点状的分生孢子器。最后全果腐烂有茶褐色粘液，干缩成僵果
二、病原：梨轮纹病菌与苹果轮纹病菌同种，其分生孢子及子囊孢子两个阶段的形态特点可参考苹果轮纹病。病菌生长适温为27℃左右在人工培养基上，于20瓦黑灯光下照射15天左右可产生分生孢子器及分生孢子。孢子在清水Φ于30℃左右经22小时萌发时孢子先产生1-3个横隔膜，然后在两端长出细长的芽管
三、侵染循环：病菌以菌丝体、分生孢子器及子囊壳在病枝干内越冬。4月至5月病斑扩展较快7-8月停止，9-10月又可继续扩展病斑至第二、三年才大量产生分生孢子器和分生孢子。3月下旬以后有雨时排出孢子由风雨传播，萌发后经皮孔侵入枝干果实在6月至7月中旬染病率最高，因温湿度适合孢子的萌发和侵染果实未成熟前发病较尐，菌丝潜伏于果皮内至成熟期抗病性减弱，病斑才陆续发生