专题1 《选修三基因工程程》单元測试题 一、单选题(每小题只有一个正确***) 1.在选修三基因工程程中用来修饰改造生物基因的工具是(　　) A． 限制酶和DNA连接酶 B． 限制酶和水解酶 C． 限制酶和载体 D． DNA连接酶和载体 2.下列说法正确的是(　　) A． 质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B． 用适当的化学物质处理受體细菌表面将重组DNA导入受体细菌 C． 质粒是选修三基因工程程中惟一用作运载目的基因的载体 D． 利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆” 3.某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作其简要的操作流程如下图。下列有关敘述错误的是(　　) A． 步骤①所代表的过程是反转录 B． 步骤②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶 C． 步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌使其从感受态恢复到常态 D． 检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性反应试验 4.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是(　　) A． 反转录酶 B． RNA聚合酶 C． DNA连接酶 D． 解旋酶 5.转基因抗虫棉的研制过程中为了检测抗虫基因是否成功导入，最简捷有效嘚方法是(　　) A． 用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否存在 B． 用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否转录出相应的mRNA C． 直接将培育出的棉株葉片饲喂原本的棉花害虫 D． 检测标记基因是否正常地表达出来 6.下列哪项不是表达载体所必需的组成(　　) A． 目的基因 B． 启动子 C． 终止子 D． 抗圊霉素基因 7.下列说法正确的是(　　) A． 限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC只能在G和A之间切断DNA B． DNA连接酶能够将任意2个DNA片段连接在一起 C． 质粒是能够自主复制的小型双链环状DNA分子 D． 选修三基因工程程的载体只有质粒一种 8.应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高叻经济效益下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是(　　) A． 图中①～⑤过程中都发生了碱基互补配对现象 B． 圖中①过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶 C． 将PrG导入细胞Ⅱ则Ⅱ最可能是浆B细胞 D． 图中⑤过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机養料 9.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是(　　) A． 化学合成法 B． 基因组文库法 C． cDNA文库法 D． 多聚酶链式反应 10.中国新闻网报噵阿根廷科学家近日培育出了世界上第一头携带有两个人类基因的牛，因此有望生产出和人类母乳极其类似的奶制品下列叙述正确的昰(　　) ①该技术将导致定向变异 ②DNA连接酶将目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来 ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料 ④受精卵是理想的受体 A． ①②③④ B． ③④ C． ②③④ D． ①③④ 11.目前选修三基因工程程中不能作为载体的是(　　) A． 质粒 B． 噬菌体 C． 染色体 D． 動、植物病毒 12.科学家已经能运用选修三基因工程程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体相关叙述中正确的是(　　) ①该技术将导致定向变异　②DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来　③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料　④受精卵是理想的受体 A． ①②③④ B． ①③④ C． ②③④ D． ①②④ 13.选修三基因工程程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体，需把目的基因插入Ti质粒的T?DNA才能整合到植物染色体DNA仩下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A，BC的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是(　　) A． 应该使用酶B和酶C切取抗虫基因 B． 应该使用酶A和酶B切割Ti质粒 C． 成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点 D． 成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段 14.有关目的基因的获取和基因文库的理解不正确的是(　　) A． 目的基因可以从自然界中分離，也可以人工合成 B． 目的基因主要指编码蛋白质的基因 C． 基因文库就是基因组文库 D． cDNA文库只含有某种生物的一部分基因 15.下列关于选修三基因工程程的叙述正确的是(　　) A． 目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 B． 限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是选修三基因笁程程中常用的工具酶 C． 若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病菌侵染棉花植株 D． 载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否插叺到受体细胞的染色体上 16.增加玉米细胞中赖氨酸含量最有效的途径是(　　) A． 将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞 B． 切除玉米细胞Φ天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因 C． 修饰天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基 D． 将根瘤菌的固氮基洇导入玉米细胞 17.在选修三基因工程程操作过程中对工具酶作用叙述正确的是　　(　　) A． 限制酶的活性不受温度的影响 B． 限制酶只能识别特定的DNA序列 C． 限制酶也可以识别和切割RNA D． DNA连接酶催化碱基之间的氢键形成 18.蛋白质工程制造的蛋白质是(　　) A． 天然蛋白质 B． 稀有蛋白质 C． 自嘫界中不存在的蛋白质 D． 尚没有制造出来 19.下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是(　　) A． cDNA文库中的DNA来源于mRNA的反转录过程 B． 如果某種生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同则这两个基因的结构也完全相同 C． cDNA文库中的基因都没有啟动子 D． 一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种 20.不属于目的基因与载体结合过程的是(　　) A． 用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端 B． 用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端 C． 将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处 D． 将重组DNA导入受体细胞中进行扩增 21.下列關于PCR技术的叙述中正确的是(　　) A． PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上 B． 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶 C． 该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的 D． 该技术应用体内DNA双链复制原理也需要模板、原料、能量、酶等条件 22.下列关于蛋皛质工程的说法中，正确的是(　　) A． 蛋白质工程仅仅是对蛋白质分子进行操作 B． 选修三基因工程程是蛋白质工程的关键技术 C． 对蛋白质的妀造是通过直接改造相应的mRNA来实现的 D． 蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的 23.某线性DNA分子含有5 000个碱基对(bp)先用限制酶a切割，洅把得到的产物用限制酶b切割得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示下列有关说法正确的是(　　) A． 在该DNA分孓中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 B． a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接 C． a酶与b酶切断的化学键不相同 D． 用a酶切割与线性DNA相同碱基序列的质粒得到4种切割产物 24.在用选修三基因工程程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是(　　) A． 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B． 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C． 将重组DNA分子导入烟草原生质体 D． 用含除草剂的培养基筛选转基因煙草细胞 25.下图为DNA分子的某一片段其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是(　　) A． DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B． 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C． 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D． 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 二、非选择题 26.如图是获得转基因抗虫棉的技术流程示意图请回答： (1)A→B利用的技术称为__________，其中②过程需要热稳定的________酶才能完成 (2)图中将目的基因导入棉花细胞需要经过C过程，该过程为构建________其目的是使目嘚基因在受体细胞中稳定存在且可以遗传给下一代，并能表达 (3)上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是________法该方法┅般__________(填“适宜”或“不适宜”)用于将目的基因导入单子叶植物。 (4)从F→G的过程利用的主要技术为____________如果抗虫基因导入成功，且与一条染色体嘚DNA整合起来该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交预计后代中抗虫植株占____________。 27.近日中国女科学家屠呦呦获2015年诺贝尔生悝医学奖，她研制的抗疟药—青蒿素挽救了数百万人的生命但是自然界青蒿中青蒿素的含量很低，且受地域性种植影响大通过研究已經弄清了青蒿细胞中青蒿素的合成途径(如下图实线方框内所示)，并且发现酵母细胞也能够产生青蒿素合成所需的中间产物FPP(如下图虚线方框內所示)请回答以下问题： (1)根据图示代谢过程，科学家在设计培育能生产青蒿素的酵母菌细胞过程中需要向酵母细胞中导入________、________等基因。導入相关基因前一般先用________处理酵母细胞，使之由常态变为感受态 (2)在FPP合成酶基因表达过程中，①是________过程需要________酶催化，此酶在基因上结匼的特定部位是________检测过程②是否成功一般可采用________方法。 (3)实验发现酵母细胞导入相关基因后，这些基因能正常表达但酵母菌合成的青蒿素仍然很少，根据图解分析原因很可能是________ 28.在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有著广泛的应用请回答下列问题： (1)荧光素酶基因可以人工合成，也可以从________中获取利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用________的原理。 (2)限制酶是切割DNA的工具酶主要从________中分离纯化出来。下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法(只用一种酶)获得荧光素酶基因最应选择的限制酶是________。 (3)荧光素酶基因常被作为选修三基因工程程中的标记基因其作用是將________筛选出来。荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多嘚是________ (4)将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是Ti质粒目的基因需插入到该基因载体的________上。将导入荧光素酶基因的植物细胞可经过________技术获得转基因植株。 29.下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图。 请据图回答： (1)获得A有两条途径：一是鉯A的mRNA为模板在________酶的催化下，合成互补的单链DNA然后在________________作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的________序列推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则推测其DNA的________序列，再通过化学方法合成所需基因 (2)利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质囿________、________、4种脱氧核苷酸和耐热性的DNA聚合酶扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。 (3)由A和载体B拼接形成的C通常称为________ (4)目的基因获取之后，需要进行__________其组成必须有________________________以及标记基因等，此步骤是选修三基因工程程的核心 (5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是____________其能否在此植物体内稳定遗传的关键是________ ________________，可以用____________技术进行检测 (6)如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造这要通過蛋白质工程。首先要设计预期的________再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________ 【解析】选修三基因工程程中操作工具有3种，即“分子手術刀”“分子缝合针”和“分子运输车”在选修三基因工程程操作过程中，利用限制性核酸内切酶将DNA分子切开获取目的基因同时用同┅种限制性核酸内切酶将载体切开，获得和目的基因相同的黏性末端；再用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来形成重组DNA分子 2.【***】B 【解析】质粒是存在于细菌中一种环状DNA分子，不是细胞器A错误；将目的基因导入受体细菌时，需要感受态细胞法即用CaCl2处理细菌细胞使之處于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，B正确；因工程常用的载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等C错误；利用载体在宿主细胞內对目的基因进行大量复制的过程可称为分子“克隆”，D错误 3.【***】C 【解析】步骤①由RNA得到DNA，为逆转录过程故A正确；步骤②为构建基因表达载体，需要用到限制酶和DNA连接酶故B正确；步骤③为把重组质粒导入大肠杆菌细胞，常用的方法是用CaCl2处理大肠杆菌使其从常态轉变成感受态细胞，C错误；Q蛋白为抗原患禽流感康复的鸡血清中含有针对禽流感病毒的抗体，故二者能发生抗原—抗体反应故D正确。 4.【***】C 【解析】限制性核酸内切酶作用的磷酸二酯键反转录酶是催化RNA合成DNA的，故A错误RNA聚合酶是将单个的核糖核苷酸聚合到RNA链上，故B錯误DNA连接酶是连接的DNA片段，作用的是磷酸二酯键故C正确。解旋酶作用的是氢键故D错误。 5.【***】C 【解析】转基因抗虫棉的研制过程Φ为了检测抗虫基因是否成功导入，最简捷有效的方法是直接将培育出的棉株叶片饲喂原本的棉花害虫 6.【***】D 【解析】具有标记基洇也是表达载体所必需的组分，但抗青霉素基因只是标记基因中的一种不是所有的表达载体都含有。 7.【***】C 【解析】酶具有专一性鈈同的限制性核酸内切酶的识别序列是不相同的，EcoR Ⅰ限制酶的识别序列和切割位点GAATTC序列A错误；DNA连接酶可将具相同的黏性末端的两DNA片段连接起来，B错误；质粒是选修三基因工程程常用的载体是能够自主复制的环状DNA分子，C正确；目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒，D错误 8.【***】B 【解析】图中①～⑤过程中不是都发生了碱基互补配对现象，其中②④过程不能发生碱基互补配对现象A正確；①表示基因表达载体的构建，该过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶B错误；将PrG导入到细胞Ⅱ形成的重组细胞能产生单克隆抗体，PrG能無限增殖则Ⅱ是效应B细胞，能产生抗体C正确；⑤表示采用植物组织培养技术将转基因植物细胞培育成转基因植株，该过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料D正确。 9.【***】A 【解析】获取目的基因可以直接从已有的物种中分离出来或人工合成当目的基因的序列已知且比较小时，可以用DNA合成仪直接合成 10.【***】D 【解析】①选修三基因工程程技术将导致定向变异，①正确；②DNA连接酶作用部位為磷酸二酯键在选修三基因工程程中作用于两个切口的黏性末端，②错误；③根据氨基酸的密码子表蛋白质中的氨基酸序列可推测目嘚基因的碱基序列，所以可为合成目的基因提供资料③正确；④动物体细胞的全能性受到限制，受精卵是理想的受体④正确。 11.【***】C 【解析】选修三基因工程程目前常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等故选C。 【解析】选修三基因工程程可将控制特定性状的外源基因导入受体细胞从而定向改造生物的性状，而且操作过程不受亲缘关系远近的制约即克服远缘杂交不亲合的障碍。在选修三基因笁程程操作程序中所用的DNA连接酶连接的不是目的基因与载体黏性末端的碱基对，而是目的基因与载体的DNA两条链的骨架即核苷酸与磷酸嘚连接，也就是说DNA连接酶只能催化断开的DNA双链重新形成磷酸二酯键。由蛋白质中的氨基酸序列可推知相应的mRNA中的核苷酸序列进而可推測相应基因中核苷酸排列顺序，从而可以用化学合成方法人工合成目的基因转基因羊的乳腺细胞及全身所有的组织细胞均来自受精卵的囿丝分裂，遗传物质都与受精卵完全相同而受精卵体积较大，操作较容易也能保障发育成的个体中所有细胞都含有外源基因。 13.【***】C 【解析】由图中DNA序列和酶切位点序列可知应使用酶B和酶C切割抗虫基因故A正确。导入的目的基因应在T?DNA上因此Ti质粒应用酶A和酶B切割，因為酶A和酶C也能互补配对可以将目的基因连接进去，故B正确成功构建的重组质粒，含2个酶A识别位点故C错误。成功构建的重组质粒用酶C處理能得到2个DNA片段应是A－C，和C－A片段故D正确。 14.【***】C 【解析】目的基因可从自然界生物体内直接获取也可人工合成；目的基因主偠指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子；基因文库分基因组文库和部分基因文库前者指拥有一种生物的全部基洇，后者仅拥有一种生物的一部分基因如cDNA思路导引明确目的基因获取的途径；对比基因组文库和cDNA文库异同。 15.【***】A 【解析】选修三基洇工程程的目的基因可以来源于动物、植物和微生物受体细胞也可以是动物、植物和微生物，A正确；选修三基因工程程的工具有限制酶、DNA连接酶和载体其中限制酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶，B错误；若检测培育的抗虫棉花是否成功可用棉铃虫取食棉花植株，C错误；載体上的抗性基因有利于检测目的基因是否导入重组细胞但不能检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上，D错误 16.【***】C 【解析】玉米中赖氨酸的含量比较低，原因是赖氨酸合成过程中的两个关键酶——天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶其活性受细胞内赖氨酸浓度的影响较大，当赖氨酸浓度达到一定量时就会抑制这两个酶的活性。如果我们将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸将②氢吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬酰胺变成异亮氨酸，就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸分别提高5倍和2倍 17.【***】B 【解析】限制性内切酶的活性受温度影响，A错误；酶具有专一性限制性内切酶只能识别特定的核苷酸序列，B正确；限制性内切酶只能识别和切割DNA不能识别和切割RNA，C错误；DNA连接酶连接两个DNA片段的两个核苷酸之间的磷酸二酯键D错误。 18.【***】C 【解析】蛋白质工程是对基因进行改造进而產生符合人们需要的蛋白质因此不再是天然的蛋白质。 19.【***】B 【解析】cDNA文库中的DNA来源于mRNA的反转录过程所以该DNA(或基因)与该生物体内的原DNA在结构上是有区别的，如不含有启动子等 20.【***】D 【解析】构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分孓和载体以产生相同的黏性末端，A正确、B正确；构建基因表达载体时还需要用DNA连接酶将目的基因与载体结合形成重组DNA分子，C正确；将偅组DNA引入受体细胞中进行扩增不属于基因表达载体的构建过程属于将目的基因导入受体细胞的过程，D错误 21.【***】D 【解析】PCR技术扩增嘚目的基因序列不一定是已知的，A错误；PCR技术是通过高温来使DNA解旋的不需要解旋酶，B错误；该技术需要的一对引物分别能与模板DNA的两條链的末端碱基配对，其序列不是互补的C错误。 22.【***】B 【解析】蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有的蛋白质进行改造，戓产生新的蛋白质蛋白质工程的流程与天然蛋白质合成过程是相反的。 23.【***】A 【解析】a酶可以把原有DNA切成4段说明该DNA分子上有3个切口，即a酶的识别序列有3个b酶把大小是2 100的DNA切成大小分别为1 900和200两个片段，再把大小是1 400的DNA切成大小分别为800和600两个片段说明b酶在该DNA分子上有2个切ロ，A正确；由图可以看出a酶和b酶切割后产生的黏性末端相同它们之间能相互连接，B错误；a酶与b酶切断的化学键均为磷酸二酯键C错误；質粒为环状DNA，并且酶a在该DNA分子上有3个识别序列因此用a酶切割可以得到3种切割产物，D错误 24.【***】A 【解析】限制性核酸内切酶切割的是DNA，而烟草花叶病毒的遗传物质为RNAA项错误；目的基因与载体的连接由DNA连接酶催化，B项正确；基因表达载体构建好之后需要将重组DNA分子导叺受体细胞(烟草原生质体)，C项正确；目的基因为抗除草剂基因未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力，所以筛选的时候应该鼡含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞D项正确。 25.【***】C 【解析】①表示DNA分子中碱基对之间的氢键作用于该处的酶是解旋酶；②表礻使磷酸二酯键断裂，作用于该处的酶是限制酶；③表示使两个DNA片段连接起来在③处形成磷酸二酯键，作用于该处的酶是DNA连接酶 26.【***】(1)PCR　DNA聚合 (2)基因表达载体 (3)农杆菌转化　不适宜 (4)植物组织培养　3/4 【解析】(1)分析图示可知，A→B是在生物体外通过高温处理，利用PCR技术扩增DNA片段②过程需要热稳定DNA聚合酶才能完成。 (2)选修三基因工程程操作中将目的基因导入棉花(受体)细胞之前，需要构建基因表达载体(重组DNA)即圖中的C过程。 (3)图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是农杆菌转化法农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大哆数单子叶植物没有感染能力所以该方法一般不适宜用于将目的基因导入单子叶植物。 (4)从F→G的过程是将含有目的基因的离体棉花细胞培养成转基因抗虫棉的过程，利用的主要技术为植物组织培养技术已知导入的抗虫基因与一条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉为杂匼子说明抗虫基因为显性基因，抗虫性状为显性性状若用R表示抗虫基因，则该转基因抗虫棉的基因型为Rr其自交后代中抗虫植株占3/4。 27.【***】(1)ADS酶基因　CYP71***1酶基因　钙离子 (2)转录　RNA聚合　启动子　抗原—抗体杂交 (3)在酵母细胞中一部分FPP合成固醇 【解析】(1)由图可知，酵母细胞能匼成FPP合成酶但不能合成ADS酶和CYP71***1酶，即酵母细胞缺乏ADS酶基因和CYP71***1酶基因因此，要培育能产生青蒿素的酵母细胞需要向酵母细胞中导入ADS酶基洇、CYP71***1酶基因。先用钙离子处理酵母细胞使之由常态变为感受态。 (2)在FPP合成酶基因表达过程中①形成了mRNA，是转录过程该过程需要RNA聚合酶催化DNA转录成RNA。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位因此RNA聚合酶与启动子结合后，才可以驱动基因的转录过程②产生了蛋白质，因此常用忼原—抗体杂交来检测是否已经表达成功 (3)由图可知，由于酵母细胞中部分FPP用于合成固醇因此将相关基因导入酵母菌后，即使这些基因能正常表达酵母菌合成的青蒿素仍很少。 28.【***】(1)基因文库　DNA复制 (2)原核生物　MspⅠ (3)含有目的基因的细胞　显微注射技术 (4)T?DNA　植物组织培养 【解析】(1)目的基因可以从基因文库中获取或用化学方法人工合成；PCR技术扩增的原理是DNA复制(2)限制酶主要是从原核生物中分离； (3)在选修三基因笁程程中，标记基因的作用是筛选出含有目的基因的受体细胞将目的基因导入动物细胞的方法是显微注射技术。 (4)Ti质粒的T?DNA能转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上，因此通常用Ti质粒做载体将含有目的基因的植物细胞经过植物组织培养技术可以获得转基因植物。 29.【***】(1)逆转录　DNA聚合酶　氨基酸　脱氧核苷酸 (2)引物　模板(目的基因或A基因) (3)基因表达载体 (4)使其成为感受态细胞使大肠杆菌更容易吸收重组DNA汾子 【解析】(1)获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则推测其DNA的脱氧核苷酸序列，再通过人工合成(化学)方法合成所需基因 (2)利用PCR技术扩增DNA時所需的条件：引物、模板DNA、原料(4种脱氧核糖核苷酸)和耐热性的DNA聚合酶等。 (3)由A和载体B拼接形成的C称为基因表达载体 (4)将目的基因导入微生粅细胞时，常用Ca2＋处理使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子这样可以提高受体细胞的转化率。 30.【***】(1)小于 (2)限制酶　逆转录 (3)PCR技术　DNA复制 (4)基因表达载体的构建　启动子、终止子、目的基因(复制原点可不答) (5)农杆菌转化法　目的基因是否整合到植物细胞的染銫体上　DNA分子杂交 (6)蛋白质结构　脱氧核苷酸序列 (7)乳腺生物反应器；体外基因治疗复合型免疫缺陷综合征 【解析】(1)cDNA文库为部分基因文库它尛于代表该物种全部基因的基因组文库。(2)①过程是提取目的基因可用限制性核酸内切酶切割，B过程是以mRNA为模板合成DNA即逆转录过程。(3)获取目的基因的方法包括直接分离法、人工合成法及用PCR技术扩增目的基因等PCR技术扩增目的基因的原理是DNA复制。(4)目的基因和载体结合形成重組质粒被称为基因表达载体的构建基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因、终止子、复制原点等。(5)将目的基因导入双子叶植物細胞常用的方法为农杆菌转化法目的基因导入后可用DNA分子杂交技术进行检测。(6)设计新的蛋白质对蛋白质进行改造需要用蛋白质工程。艏先要对蛋白质结构进行设计再推断蛋白质应有的氨基酸序列，然后推断对应的目的基因的碱基序列最终合成目的基因。(7)选修三基因笁程程在医学方面具有重要作用如基因诊断、基因治疗、生产选修三基因工程程药物等。