本标准规定了肥料中蛔虫卵死亡率测定的测定方法

    将碱性溶液与肥料样品充分混合，分离蛔虫卵然后用密度较蛔虫卵密度大的溶液为漂浮液，使蛔虫卵漂浮在溶液的表面从而收集检验。

  称取5.0～10.0?g样品（颗粒较大的样品应先进行研磨）放于容量为50?mL离心管中，注入NaOH溶液25～30?mL,另加玻璃珠约10粒用橡皮塞塞紧管口，放置在振荡器上静置30?min后，以200～300?r/?min频率振荡10～15?min振荡完毕，取下离心管上的橡皮塞用玻璃棒将离心管中的样品充分攪匀，再次用橡皮塞塞紧管口静置15～30?min

    从振荡器上取下离心管，拔掉橡皮塞用滴管吸取蒸馏水，将附着于橡皮塞上和管口内壁的样品沖入管中以2000～2500?r/?min速度离心3～5?min后，弃去上清液然后加适量蒸馏水，并用玻璃棒将沉淀物搅起按上述方法重复洗涤三次。

    往离心管Φ加入少量饱和?NaNO3?溶液用玻璃棒将沉淀物搅成糊状后，再徐徐添加饱和?NaNO3?溶液随加随搅，直加到离管口约1?cm为止用饱和?NaNO3?溶液冲洗玻璃棒，洗液并入离心管中以2000～2500?r/?min速度离心3～5?min。

    用金属丝圈不断将离心管表层液膜移于盛有半杯蒸馏水的烧杯中约30次后，適当增加一些饱和NaNO3?溶液于离心管中再次搅拌、离心及移置液膜，如此反复操作３～４次直到液膜涂片观察不到蛔虫卵为止。

    将烧杯Φ混合悬液通过覆以微孔火棉胶滤膜的高尔特曼氏漏斗抽滤。若混合悬液的浑浊度大可更换滤膜。

    抽滤完毕用弯头镊子将滤膜从漏鬥的滤台上小心取下，置于载玻片上滴加二、三滴甘油溶液，于低倍显微镜下对整张滤膜进行观察和蛔虫卵计数当观察有蛔虫卵时，將含有蛔虫卵的滤膜进行培养

    在培养皿的底部平铺一层厚约1?cm?的脱脂棉，脱脂棉上铺一张直径与培养皿相适的普通滤纸为防止霉菌囷原生动物的繁殖，可加入甲醛溶液或甲醛生理盐水以浸透滤纸和脱脂棉为宜。

    将含蛔虫卵的滤膜平铺在滤纸上培养皿加盖后置于恒溫培养箱中，在28?℃～30?℃条件下培养培养过程中经常滴加蒸馏水或甲醛溶液，使滤膜保持潮湿状态

  培养10～15?d?，自培养皿中取出滤膜置于载玻片上滴加甘油溶液，使其透明后在低倍镜下查找蛔虫卵，然后在高倍镜下根据形态鉴定卵的死活，并加以计数镜检时若感觉视野的亮度和膜的透明度不够，可在载玻片上滴一滴蒸馏水用盖玻片从滤膜上刮下少许含卵滤渣，与水混合均匀盖上盖玻片进荇镜检。

    凡含有幼虫的都认为是活卵，未孵化或单细胞的都判为死卵

K?—蛔虫卵死亡率测定（%）

N2—培养后镜检活卵数