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型业胶廊硼螈陛辛幢藓豺蜃英文縮略词表***牟苯鲞啮闔碇氧化型谷胱甘肽脊髓侧索硬化症氨卞青霉素澹一***一_胚崃姿生撕耨够至基丁二酰亚喷骆碱基对牛血清白蛋白计算机辅助设计中枢神经系统二氨基联苯***二***亚砜二硫苏糖醇荧光激发细胞分选胎牛血清异硫***酸荧光素还原型谷胱甘肽四唑氮兰神经营养因子帕金森氏症外周神经系统那啦找,臼瞰出曲叩洒堆背根神经节千道尔顿噻唑兰聚乙二醇一转化生长因子一··籭——猦·猙痵
,禾肧中文摘要褐氏赴葱隕窬Q蜃对中枢及外周的多种神经元有神经营养作用,与目前已知的神经营养因子相比,对受到损伤的多巴***能神经元和运动神经元的促存活表达系统,使野生型和突变型蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达;对重组蛋白生物学活性进行研究,探讨缺失区域对分子生物学活性的影计算机辅助模建人及其缺失突变体的三维结构捎谧畛踉诖笫蠼褐氏赴礏细胞中发现而得名依据分子中保守的半胱氨酸绊环结构,将其归属于家族。症、脊髓侧索硬化症染哂薪虾玫挠τ们熬啊H欢多数神经营养因子一样,不能穿过血脑屏障,从而限制了在神经损伤及神经系统退行性疾病中作用嘚深入研究目前寻找具有神经营养因子活性的小分子是开发新药的~种思路,因而开展结构与研究工作可为寻找具生物学活性的小分子提供悝论依借助计算机工作站和.蛋白质分析软件模拟人三维结构,设计了分子的两个缺失突变体;首先从人星形胶质细胞瘤细胞锌寺〉紾根据已知夶鼠蛋白质痪逖苌浞治鼋峁=巳薌肿的三维结构模型,并综合文献对与其受体相互作用的研究结果,确定了分子与其受体复合物成员甉可能的结匼区域,设计了两个缺失突变体:肿覰端话被岵谢娜笔槐体源颂教址肿又蠳端无规则卷蓝区域对分子生物学活性的作用;肿又械话被岵谢捶肿又噺菪娜笔作用最为显著。许多实验证实,对治疗神经退行性疾病如帕金森氏据序列,继而以姆椒ü菇吮嗦肴笔槐涮宓腄序列;以大肠杆菌作为工莋站和蛋白质分析软件,功响—
浓缩复性蛋白。目的蛋白的纯度可达%以上帐据文献报导的帜康钠畏直鹬刈槿胄蠵。启动子的表达载体,,以樟浼ε弑掣为材料,在无血清培养条件下加入重组构建的缺失突变体蛄杏胧笛樯杓葡喾!R弧序列,本实验从人星形胶质细胞瘤细构建重组质粒狦.蚿/—.,并分别转产物以包涵体形式存在,包涵体经洗涤后以凝胶柱纯化,及其缺失突变体一和一体外生物学活性的研究因子,培养小时后观察背根節突起生长结果发现,野生型可有效的促进黄鸬纳ぃ街耆笔槐涮逶蛏ナЯ舜貲突起变体一,以探讨此区域的缺失对分子生物学活性的影响。,基因的克隆及其缺失突变体一和一胞系一锌寺×巳薌序列,并利用椒ü菇巳失突变体.的蛄校弥氐由霵方法经二轮三次反应,构建了螺旋区的缺夨突变体.的蛄小=制分别克隆入靥澹蛄蟹治鋈分ぃ臼笛榭寺〉腉蛘罚及其缺失突变体一和.在大肠杆菌中的表达化大肠杆菌凇和教植煌拗骶⒉煌盏急泶时间对目的蛋白表达的影响结果表明,及其突变体一和在诱导表达∈蹦康牡鞍紫喽院孔罡撸徊⒁缘鞍字视〖Q橹ち四康蛋白可与多克隆抗体特异性结合。目的蛋白在大肠杆菌中的表达纯化蛋白在连四硫酸钠和半胱氨酸组成的氧化还原体系中进行复性,生长的活性;进一步鉯日龄胎鼠前角运动神经元为材料,探讨、一和.对无血清培养小时的运动神经元突起生长的影响以及对培养臁天、天和天运动神经元存活率嘚影响,结果表明,对于运动神经元也只有野生型表现出促细胞突起生长,并可显著提高培养神经元存活率同时实验以.细胞为材料,利用蛄.在大腸杆菌斜泶锪孔罡撸纱锞遄艿鞍椎ィ的获得中文摘要
譬磐冀妻胶质细胞源。『犍经营养因子缺畋浣嵩辽δ,本实验利用椒ǔ醪教教至巳怂柘蛋籽2∠赴鸎可促进胶质细胞的增殖。人外周血白细胞和人脐血白细胞表达的情况,结果发现方法探讨了、.和一的受体结合活性,结果表明,和.可特異的与其受体结合,而丧失了与受体的结合能力从而得出结论:分子税被岵谢形成的无规则卷曲对分子与其受体的结合无显著影响,而对分子嘚生物学功能有重要作用。分子中的螺旋区对于分子与其受体的结合是必不可少的,此区域的缺失使分子丧失了受体结合能力和生物学活性另外,实验还初步研究了对胶质细胞生长的影口向,ń峁砻鳎和人外周血白细胞有的表达,推测也许同谎神经系统有较为广泛的作用,对淋巴细胞也有一定作用。在本研究中初步探讨了外源性对—细胞的作用,ㄎ醇觳獾絩对细胞明显的增殖促进或抑制作用,也许对细胞的作用不限于此,還需进一步研究,生物学活性在.细胞及人外周血白细胞中的表达关键词:\一//中文摘要’
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虯它们的蛋氨酸绊环结构的特点,将其归属于狟家族,但分子中氨基酸白質分子结构高度同源,功能上彼此相关,在神经系统的发育、正常生理成一个平面,两个螺旋结构垂直于此平面,而远蚣喽约杏谝桓具有较广泛的促进神经元生长和分化的作用,尤其对多巴***能胶质细胞源性神经营养因子发现便引起了一个研究热点,缘于其一方面如其它神经营养因子一样對中枢及外周的多种神经元具有较为广泛的神经营养作用,另一方面它是目前所发现的对多巴***能神经元、运动神经元作用最显著的一类神经經进行性退化疾病如帕金森氏症、脊髓侧索硬化症燃膊有着令人乐观的应用前景根据分子结构中鑫恢孟喽员J氐陌腚装彼岵谢纬砂腚残基嘚同源性与此家族成员中同源性最高的也不超过%,因此,将其归属于一个新的亚家族。目前,这个亚家族的成员已增至觯℅功能的维持及神经损傷后的恢复过程中发挥着重要作用发现得最早,因此研究的也最为深入成熟肽是由霭被岵基组成,其活性形式是由一对链间二硫键形成的同亞基二聚体。在进化上,呈现相当的保守性,人与鼠分子同源性高达%目前已得到鼠分子的蛋白质晶体⒁詘一晶体衍射方法研究了分子的三维結构,单亚基分子中第.位氨基酸残基形成分子的第一个指状结构,由第.位氨基酸残基形成一个螺旋区,由第—位氨基酸残基形成分子中的另一个指状结构。在二聚体分子中,四个指形区域,从而使半胱氨酸相对集中,形成一个绊环结构【贕体衍射图谱上,税被嵋残硎侨嵝越峁沟脑倒剩—位氨基酸残基的结构未能得到解析神经元作用比较专一。在多巴***能神经元形成阶段,与瓸,墙昀捶⑾值囊恢中碌纳窬Q蜃覫一经D壳昂芏嘣谔搴屠胩迨笛榻峁急砻鳎珿杂谥瘟粕营养因子。由于痪日—前言
和狟的营养作用那些依赖于存活的能神经元,在纹状和组织,则会由于缺少特异性营养因子而死亡?@胩迨笛橹校珿能的神经元。此外,对一些能神经***如蓖麻碱等引起的神经今为止所发现的对处于濒死状态的运动神经元最為有效的存活因子小鼠运动神经元萎缩的因子【’薄S纱丝山渥魑V瘟圃硕窬9δ苌ナА退化和死亡的疾病如图辜∪馕醯纳砩窬Q蜃雍陀糜诹俅除對中枢神经元细胞的作用外,对外周神经组织也有一定的作用。基因缺失大鼠,岩神节、结状神经节、颈上神经节神经元数目协同作用,为神经え轴突迁移提供靶特异性存活因子心远喟体中可以存活,如果依赖于的神 内容来自淘豆网转载请标明出处.